關(guān)于自動進樣器在HPLC分析中的應(yīng)用
更新時間：2017-03-27
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自動進樣器在生化分析儀器，色譜分析儀器中有著廣泛應(yīng)用，它的運行可靠性和性直接影響著分析結(jié)果。液相色譜系統(tǒng)大多使用自動進樣器引入樣品，正確使用自動進樣器是保證液相色譜系統(tǒng)分離度的基本條件，用自動進樣器注入適當體積的標準樣品可為峰高和峰面積的測量提供小于1%的標準偏差。
對于液相色譜而言，無論是手動進樣器或是自動進樣器都是用六通閥進樣的，只是自動進樣的較手動進樣器的死體積較大，多了計量泵和一部分聯(lián)接管線。自動進樣器可以減少體力勞動，增加樣品處理量，提高日常工作精度。
現(xiàn)在的色譜實驗室，大都使用六通進樣閥或自動進樣器。進樣裝置要求：密封性好，死體積小，重復性好，保證中心進樣，進樣時對色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。HPLC分析進樣方式可分為：隔膜進樣、停流進樣、閥進樣、自動進樣。
1.隔膜進樣。
用微量注射器將樣品注入專門設(shè)計的與色譜柱相連的進樣頭內(nèi)，可把樣品直接送到柱頭填充床的中心，死體積幾乎等于零，可以獲得*的柱效，且價格便宜，操作方便。但不能在高壓下使用(如10MPA以上);此外隔膜容易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應(yīng)，使進樣重復性只能達到1～2%;加之能碉各種溶劑的橡皮不易找到，常規(guī)分析使用受到限制。
2.停流進樣。
可避免在高壓下進樣。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新啟動時往往會出現(xiàn)“鬼峰”;另一缺點是保留時間不準。在以峰的始末信號控制餾分收集的制備色譜中，效果較好。
3.閥進樣。
一般HPLC分析常用自動進樣器六通進樣閥，其關(guān)鍵部件由圓形密封墊子(轉(zhuǎn)子)和固定底座(定子)組成。由于閥接頭和連接管死體積在存在，柱效率低于隔膜進樣(約下降5～10%左右)，但耐高壓(35～40MPA)，進樣量準確，重復性好(0.5%)，操作方便。
